Автоматический счетчик клеток

Автоматический счетчик клеток Countess II / II FL (колориметрия / колориметрия + флуоресценция)

"Новый автоматический счетчик клеток Countess II® Cell FL можно охарактеризовать как точный, надежный и простой в применении прибор" - Рави Патак, доктор наук Бейлорский колледж медицины

Новый автоматический счетчик клеток (колоний) Countess® II FL — это настольный прибор с ультрасовременной оптикой и программным обеспечением для анализа изображений, предназначенный для быстрого подсчета клеток в суспензии. Гибкость работы за счет наличия трех каналов — светлого поля и двух дополнительных флуоресцентных каналов - позволяет исследователям быстро проводить подсчет клеток, следить за экспрессией флуоресцентных белков и определять жизнеспособность клеток.

  • Гибкость — вы можете подбирать подходящие флуоресцентные оптические фильтры для каждого вашего эксперимента
  • Выгода в цене — возможность мнонократного использования слайда позволяет снизить затраты на расходные материалы
  • Точность — автофокус для повышения точности измерений и уменьшения вариабильности
  • Простота — удобный интерфейс с сенсорным экраном

Клетки слипаются?

Рис. 1. Точный подсчет клеток - даже в образцах со слипшимися клетками - на автоматическом счетчике клеток Countess® II FL. Клетки NIH/ЗТЗ смешивали 1:1 в суспензии с 0,4% раствором трипанового синего красителя Trypan Blue Stain (артикул Т10282), после чего 10 мкп образца добавляли на слайд (артикул C10228) и помещали в автоматический счетчик клеток Countess® II FL. Алгоритмы по сегментации и подсчету клеток прибора позволили ему посчитать клетки внутри конгломератов и разделить их на живые и мертвые с помощью метода исключения трипанового синего.

Для автоматического счетчика клеток Countess® II FL это не проблема. Обычно в образцах со слипшимися клетками трудно точно произвести подсчет как вручную, так и с помощью автоматических методов. Усовершенствованные алгоритмы автоматического счетчика клеток Countess® II FL четко определяют границы клеток внутри конгломератов, что обеспечивает получение точных и достоверных значений при подсчете клеток даже в самых трудных образцах (Рис. 1).

 

Слайды для многократного или однократного применения

Рис. 2. Варианты слайдов для многократного применения для автоматического счетчика клеток Countess® II FL.

Автоматический счетчик клеток Countess® II FL делает возможным использование слайдов для многократного применения, что значительно снижает затраты на расходные материалы. Те, кто предпочитает одноразовые слайды, может использовать в новом счетчике слайды для оригинального автоматического счетчика клеток Countess®, предназначенные для однократного применения (Рис. 2).

 

Точный и достоверный подсчет

Рис. 3. Точный и достоверный подсчет клеток с помощью автоматического счетчика клеток Countess® II FL. Клетки NIН/ЗТЗ, HeLa и НL-60 смешивали в соотношении 1:1 в суспензии с 0,4% раствором трипанового синего Trypan Blue Stain (Артикул Т10282), после чего проводили подсчетс помощью метода исключения трипанового синего. 10 мкл образца наносили на слайд (C10228) и помещали в автоматический счетчик клеток Countess® II FL. (синяя полоса) или в гемоцитометр, где производили подсчет вручную с помощью микроскопа ()фиолетовая полоса). Каждая полоса - среднее из десяти проведенных подсчетов, с указанным стандартным отклонением. Автофокусирование и усовершенствованные алгоритмы автоматического счетчика клеток Countess® II FL обеспечивают более высокую точность подсчета клеток по сравнению с подсчетом вручную.

Автоматический счетчик клеток Countess® II FL содержит усовершенствованную систему автофокусирования и специальные алгоритмы подсчета, которые позволяют быстро и точно детектировать клетки в популяции и производить их подсчет. После загрузки слайда счетчик фокусируется на клетках автоматически, что снижает долю ошибок, связанных с ручной настройкой фокуса. (Рис. 3).

 

Подсчет флуоресцентно окрашенных клеток, подходящий для условий вашего исследования

Автоматический счетчик клеток Countess® II FL использует те же световые флуоресцентные кубы, которые применяются в системах для флуоресцентной визуализации EVOS®. Кубы EVOS® содержат светодиоды и высококачественные фильтры, представляющие собой инновационную систему освещения, и обеспечивают точный контроль, минимальную потребность в обслуживании и исключительную надежность. Благодаря возможности замены световых кубов EVOS®, автоматический счетчик клеток Countess® II FL может подстраиваться под изменяющиеся нужды вашей лаборатории. При изменении задач вашего эксперимента флуоресцентные характеристики Countess® II FL можно усовершенствовать за счет установки новых световых кубов.

Широкий диапазон детектирования флуоресценции

Благодаря возможности выбора более чем из 15 разных световых кубов EVOS®, возможности автоматического счетчика клеток Countess® II FL не ограничены анализом клеток, экспрессирующих GFP и RFP (Таблица 1). Вы хотите измерить эффективность трансфекции клеток, в которые была трансдуцирована RFP-экспресирующая конструкция с помощью синего ядерного красителя? Без проблем. Просто используйте световые кубы RFP и DAPI и вы сможете успешно посчитать число клеток, экспрессирующих RFP в общей популяции и достоверно определять эффективность трансфекции (Рис. 4 и 5)

Рис. 4. двуцветный флуоресцентный подсчет клеток с GFP и RFP. 10 мкл клеток HeLa трансдуцировали CellLight® Histone 2В-RFP (С10595) и окрашивали NucBlue® Live ReadyProbes®. Реактив наносили на слайд (C10228) и помещали в автоматический счетчик клеток Countess® II FL оснащенный световыми кубами DAPI (АМЕР4650) и RFP (АМЕР4652). Алгоритмы сегментации и подсчета нового счетчика позволяют выявлять и считать клетки на основе их флуоресцентных характеристик. В данном эксперименте 86% клеток HeLa от всей популяции подверглись трансдукции конструкцией CellLight® Histone 2В-RFP. Рис. 5. двуцветный GFP- и DAPI- флуоресцентный подсчет клеток. 10 мкл клеток HeLa были трансдуцированы конструкцией CellLight® Mitochondria-GFP (C10600) и окрашены NucBlue® Live ReadyProbes®. Реактив наносили на слайд (C10228) и помещали в автоматический счетчик клеток Countess® II FL оснащенный световыми кубами DAPI (АМЕР4650) и GFP (АМЕР4651). Алгоритмы сегментации и подсчета нового счетчика позволяли определять и считать клетки, различая их флуоресцентные характеристики. В данном эксперименте 72% клеток HeLa от всей популяции подверглись трансдукции конструкцией CellLight® Mitochondria-GFP.

Световые кубы EVOS® для автоматического счетчика клеток Countess® II FL

Сердцем флуоресцентной технологии Countess® являются запатентованные световые кубы EVOS®. Каждый куб содержит светодиод, коллиматорную оптику и фильтры. Световые фильтры легко можно заменять, они автоматически определяются системой Countess®, поэтому с ними можно работать сразу после их установки. Широкий выбор световых кубов обеспечивает гибкость для всевозможных флуоресцентных исследований, таких как анализ жизнеспособности клеток (Рис. 6).

Таблица 1. Стандартные флуоресцентные световые кубы для автоматического счетчика клеток Countess® II FL

Световой куб Возбуждение (нм) Эмиссия (нм) Стандартные подходящие красители/флуоресцентные белки
DAPI 357/44 447/60 DAPI, Hoechst, BFP
TagBFP 390/18 447/60 TagBFP
CFP 445/45 510/42 ECFP, Lucifer Yellow
GFP 470/22 510/42 GFP, Alexa Flour® 488, SYBR® Green, FITC
YFP 500/24 524/27 EYFP, acridine orange (+DNA)
RFP 531/40 593/40 RFP, Alexa Flour® 546, Alexa Flour® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato
Texas Red® 585/29 624/40 Texas Red®, Alexa Flour® 568, Alexa Flour® 594, MitoTracker® Red, mCherry
Cy®5 628/40 692/40 Cy®5 , Alexa Flour® 647, Alexa Flour® 660, DRAQ5®
Cy®5.5 655/46 794/16 Cy®5.5

Рис. 6. Жизнеспособность клеток. Подвергнутые тепловой обработке клетки HL-60 смешали с необработанными клетками в соотношении приблизительно 15:85. Чтобы исследовать жизнеспособность клеток в популяции, клетки окрашивали NucBlue® Live и NucGreen® Dead 488. 19 мкл клеток наносили на слайд и помещали в автоматический счетчик клеток Countess® II FL, оснащенный световыми кубами DAPI (АМЕР4650) и GFP (АМЕР4651). Как и ожидалось, окрашивание NucGreen® Dead 488 (зеленый) показало, что 14% популяции клеток HL-60 были мертвыми.

Таблица 2. Клеточные линии, валидированные для автоматического счетчика клеток Countess® II FL

Тип клеток Млекопитающее Орган
A431 Человек Кожа
Адипоциты Человек Стволовые клетки адипозного происхождения
Гладкая мускулатура аорты Человек Гладкая мускулатура
CHO-M1WT2 Китайский хомяк Яичник
CHSE Чавыча Эмбрион
COLO-205 Человек Кишечник
COS-7 Африканская мартышка Почка
HEK-293 Человек Почка
HeLa Человек Шейка матки
HepG2 Человек Печень
HL-60 Человек Кровь
J774A.1 Мышь Кровь
Jurkat Человек Кровь
K562 Человек Костный мозг
MCF7 Человек Грудь
MRC-5 Человек Легкое
NIH/3T3 Мышь Эмбрион
PC-12 Крыса Надпочечник
Эндотелиальные клетки легочной артерии Человек Кровеносный сосуд
Гладкая мускулатура легочной артерии Человек Гладкая мускулатура
SF-21 Насекомое Яичник
U266 Человек Кровь
U-2 OS Человек Кость
Эндотелиальные клетки пуповинной вены Человек Кровеносный сосуд
Цельная лизированная кровь Человек Кровь

Таблица 3. Технические спецификации автоматического счетчика клеток Countess® II FL

  Тип прибора: Настольный счетчик клеток и платформа для исследования клеток в суспензиях
  Оптика: 3 канала: 1 канал для светлого поля и 2 флуоресцентных канала (заменяемые светодиодные кубы EVOS)
  Освещение: светодиод LED (50 000 часов)
  Камера: 5 мегапикселей
  Объектив: 2,5х
  Суммарное увеличение: ~55х
  Время обработки: < 10 секунд
  Диапазон концентрации образца: от 1х104 до 1х107 клеток/мл
  Диапазон размера частиц/клеток: 4-60мкм/7-60мкм
  Необходимый объем образца: 10 мкл
Технические спецификации прибора Встроенное программное обеспечение: платформа автоматического счетчика клеток Countess®
  USB-диск: 4Гб
  Рабочая мощность: 100-240 ВАК, 0,58 А максимально
  Частота: 50/60Гц
  Электрический вход: 12 В постоянного тока, 2А
  Рабочая температура: 10 - 40° С
  Влажность: < 80% (без конденсации)
  Размеры: 139,7 мм (ширина) х 139,7 мм (длина) х 228,6 мм (высота)
  Вес: 3,6 кг
  Материал: Стекло
Слайды для многократного применения Параметры слайда: 32 мм (ширина) х 76 мм (длина) х 3,9 мм (толщина)
Покровное стекло: 20мм (ширина) х 26мм (длина) х 0,5мм (толщина)
  Объем камеры: 10 мкл
  Материал: полиметилметакрилат
Одноразовый слайд Параметры слайда: 25 мм (ширина) х 75 мм (длина) х 1,7 мм (толщина)
  Объем камеры: 10 мкл

Вам нужен простой счетчик клеток в светлом поле? Вы оцените по достоинству автоматический счетчик клеток Countess® II.

Характеристика Countess® II Countess® II FL
Автофокус
Сенсорный экран
Счет в светлом поле
Счет по трипановому синему
Одноразовые слайды
Слайды для многократного применения  
Работает с флуоресценцией/возможен соответствующий апгрейд  
Применение световых кубов EVOS®  

Информация для заказа

Product Количество Кат. номер
Countess® II FL Automated Cell Counted 1 AMQAF1000
Countess® II Automated Cell Counted 1 AMQAF1000
Countess® Cell Counting Chamber Slides 50 С10228
Countess® II FL Reusable Slide 1 А25750
Countess® II FL Reusable Slide Holder 1 АМЕР4746
EVOS® Light Cube, DAPI 1 АМЕР4650
EVOS® Light Cube, TagBFP 1 АМЕР4668
EVOS® Light Cube, YFP 1 АМЕР4654
EVOS® Light Cube, GFP 1 АМЕР4651
EVOS® Light Cube, RFP 1 АМЕР4652
EVOS® Light Cube, Texas Red® 1 АМЕР4655
EVOS® Light Cube, Cy®5 1 АМЕР4656
EVOS® Light Cube, Cy®5.5 1 АМЕР4673

Отправить запрос
* Содержание запроса:
* Название организации:

Подразделение/
кафедра/
лаборатория:

* Город(адрес):
* ФИО:
* E-mail:
Телефон:
Комментарий:
* Код: Введите код 

Отсылая данный запрос в компанию Химэксперт, Вы даете согласие на обработку Ваших персональных данных и их включение в базу данных в соответствии с законодательством Российской Федерации.

 
Обратная связь
* ФИО:
E-mail:
* Телефон:
* Сообщение: